Я предпочел использовать метод гель-электрофореза для разделения белков по плотности. Этот метод является одним из самых распространенных и эффективных способов анализа белковой фракции.
Гель-электрофорез основан на разделении белков в геле под действием электрического поля. Гель может быть сделан из агарозы или полиакриламида. Чаще всего используются гели из полиакриламида, так как они обладают лучшим разрешением и позволяют разделить белки по их молекулярной массе. Процесс гель-электрофореза включает в себя несколько шагов. Сначала гель приготавливается с помощью специальных реагентов и разливается в горизонтальную или вертикальную камеру. Затем образуется очень узкий и равномерный слой геля. После приготовления геля подготавливается проба, содержащая белки, которые нужно разделить. Проба с белками наносится на поверхность геля в узком и равномерном слое. Затем проба вводится в камеру гель-электрофореза и подключается к источнику электрического поля. Когда электрическое поле включается, белки в пробе начинают перемещаться через гель. Белки с различной молекулярной массой имеют разную подвижность и, следовательно, перемещаются с разной скоростью. Белки с большей молекулярной массой движутся медленнее и останавливаются раньше, чем белки с меньшей массой. По истечении определенного времени гель-электрофореза, электрическое поле отключается и гель извлекается из камеры. Затем гель окрашивается или подвергается обработке для визуализации разделенных белков. В результате получаются разные полосы, которые представляют собой отдельные белковые фракции.
Гель-электрофорез является очень мощным методом для анализа состава и разделения белков. Он широко применяется в биологическом и медицинском исследовании для идентификации и изучения различных белковых молекул. Этот метод позволяет отделить белки по их молекулярной массе и определить их количество в пробе.